Ανάλυση Εντερικού Μικροβιώματος με Αλληλούχιση 16S rRNA: Τι Δείχνει, Πότε Γίνεται & Πώς Ερμηνεύεται
Τελευταία ενημέρωση:
1
Τι είναι το εντερικό μικροβίωμα
Το εντερικό μικροβίωμα αποτελείται από τρισεκατομμύρια μικροοργανισμούς — κυρίως βακτήρια, αλλά και αρχαία και μύκητες — που αποικίζουν κυρίως το παχύ έντερο. Το συνολικό γενετικό τους υλικό υπερβαίνει κατά πολύ το ανθρώπινο γονιδίωμα και λειτουργεί πρακτικά ως ένα «μεταβολικό όργανο» του οργανισμού.
Τα μικρόβια αυτά συμμετέχουν ενεργά στην πέψη σύνθετων υδατανθράκων, στη σύνθεση βιταμινών (όπως η βιταμίνη Κ και ορισμένες του συμπλέγματος Β), στη ρύθμιση του ανοσοποιητικού συστήματος και στον ενεργειακό μεταβολισμό.
Η ισορροπία και η ποικιλότητα των βακτηριακών πληθυσμών θεωρούνται βασικοί δείκτες εντερικής υγείας. Όταν αυτή διαταράσσεται (δυσβίωση), αυξάνεται ο κίνδυνος εμφάνισης γαστρεντερικών, μεταβολικών και χρόνιων φλεγμονωδών διαταραχών.
2
Τι είναι η αλληλούχιση 16S rRNA
Η ανάλυση 16S rRNA βασίζεται στην αλληλούχιση ενός συντηρημένου γονιδίου που υπάρχει σε όλα τα βακτήρια, αλλά περιέχει μεταβλητές περιοχές ειδικές για κάθε γένος ή είδος. Το γονίδιο αυτό λειτουργεί σαν «μοριακό αποτύπωμα», επιτρέποντας την αναγνώριση εκατοντάδων βακτηριακών πληθυσμών χωρίς ανάγκη καλλιέργειας.
Η τεχνική εφαρμόζεται με τεχνολογία Next Generation Sequencing (NGS): εξάγεται DNA από δείγμα κοπράνων, ενισχύεται το γονίδιο 16S με PCR και στη συνέχεια αλληλουχίζεται μαζικά.
Το τελικό αποτέλεσμα είναι ένας λεπτομερής χάρτης της βακτηριακής σύστασης του εντέρου, με ποσοστιαία κατανομή γενών και ειδών, καθώς και δείκτες μικροβιακής ποικιλότητας — όχι απλή ανίχνευση μεμονωμένων παθογόνων μικροοργανισμών.
3
Πώς γίνεται η εξέταση
Ο εξεταζόμενος συλλέγει μικρή ποσότητα κοπράνων σε αποστειρωμένο δοχείο, συνήθως στο σπίτι, ακολουθώντας συγκεκριμένες οδηγίες ώστε να αποφευχθεί επιμόλυνση του δείγματος.
Στο εργαστήριο πραγματοποιείται εξαγωγή μικροβιακού DNA, ενίσχυση του γονιδίου 16S rRNA με PCR και στη συνέχεια μαζική αλληλούχιση με τεχνολογία Next Generation Sequencing (NGS).
Τα παραγόμενα δεδομένα αναλύονται βιοπληροφορικά, οδηγώντας σε ποσοτική χαρτογράφηση των βακτηριακών γενών και ειδών, καθώς και σε υπολογισμό δεικτών μικροβιακής ποικιλότητας.
4
Τι πληροφορίες λαμβάνουμε
Η εξέταση παρέχει δείκτες βακτηριακής ποικιλότητας, σχετική αφθονία κύριων φυλών (όπως Firmicutes και Bacteroidetes), παρουσία δυνητικά παθογόνων μικροοργανισμών και πιθανή έλλειψη προστατευτικών στελεχών.
Το αποτέλεσμα δεν αποτελεί διάγνωση συγκεκριμένης νόσου, αλλά λειτουργικό προφίλ του εντερικού οικοσυστήματος, το οποίο βοηθά στην κατανόηση πιθανών παθοφυσιολογικών μηχανισμών πίσω από τα συμπτώματα.
5
Δυσβίωση – τι σημαίνει
Δυσβίωση ονομάζεται η διαταραχή της φυσιολογικής ισορροπίας μεταξύ ωφέλιμων και επιβαρυντικών βακτηρίων του εντέρου, με ταυτόχρονη μείωση της μικροβιακής ποικιλότητας.
Η κατάσταση αυτή έχει συσχετιστεί με σύνδρομο ευερέθιστου εντέρου, παχυσαρκία, σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2, χρόνιες φλεγμονώδεις καταστάσεις και αυτοάνοσα νοσήματα, χωρίς όμως να αποτελεί από μόνη της διαγνωστικό κριτήριο.
6
Πότε ενδείκνυται η ανάλυση εντερικού μικροβιώματος
Η ανάλυση εντερικού μικροβιώματος ενδείκνυται κυρίως σε επίμονα γαστρεντερικά συμπτώματα, όπως φούσκωμα, εναλλαγές διάρροιας–δυσκοιλιότητας και κοιλιακό άλγος, καθώς και σε ασθενείς με σύνδρομο ευερέθιστου εντέρου.
Χρησιμοποιείται επίσης σε ανεξήγητη κόπωση, μεταβολικές διαταραχές, επαναλαμβανόμενες λοιμώξεις ή αυτοάνοσα νοσήματα, αλλά και στο πλαίσιο εξατομικευμένης διατροφικής προσέγγισης, ιδιαίτερα μετά από παρατεταμένη χρήση αντιβιοτικών.
7
Σύνδεση μικροβιώματος με μεταβολικά νοσήματα
Μεταβολές στη βακτηριακή ποικιλότητα και στη σχετική αφθονία συγκεκριμένων στελεχών έχουν συσχετιστεί με παχυσαρκία, αντίσταση στην ινσουλίνη και σακχαρώδη διαβήτη τύπου 2.
Ορισμένα εντερικά βακτήρια επηρεάζουν την ενεργειακή απορρόφηση από την τροφή και τη χαμηλού βαθμού φλεγμονή, δημιουργώντας μεταβολικό περιβάλλον που ευνοεί την ανάπτυξη χρόνιων μεταβολικών νοσημάτων.
8
Μικροβίωμα και ανοσοποιητικό σύστημα
Περισσότερο από το 70% του ανοσοποιητικού ιστού εντοπίζεται στο έντερο. Το εντερικό μικροβίωμα «εκπαιδεύει» τα ανοσοκύτταρα, ρυθμίζει τη φλεγμονώδη απάντηση και συμβάλλει στην άμυνα έναντι παθογόνων μικροοργανισμών.
Η δυσβίωση μπορεί να διαταράξει αυτή την ισορροπία, αυξάνοντας την πιθανότητα εμφάνισης αλλεργιών, χρόνιων φλεγμονών και αυτοάνοσων νοσημάτων.
9
Μικροβίωμα και ψυχική υγεία (άξονας εντέρου–εγκεφάλου)
Ο άξονας εντέρου–εγκεφάλου αποτελεί ένα σύνθετο δίκτυο επικοινωνίας μεταξύ εντερικού μικροβιώματος, ανοσοποιητικού συστήματος και κεντρικού νευρικού συστήματος.
Τα εντερικά βακτήρια συμμετέχουν στη ρύθμιση νευροδιαβιβαστών, όπως η σεροτονίνη και το GABA, καθώς και στην παραγωγή μεταβολιτών που επηρεάζουν τη νευροφλεγμονή.
Κλινικές μελέτες έχουν συσχετίσει τη δυσβίωση με άγχος, καταθλιπτικά συμπτώματα και γνωστικές διαταραχές. Παρ’ όλα αυτά, η ανάλυση μικροβιώματος δεν αποτελεί ψυχιατρικό διαγνωστικό εργαλείο, αλλά συμπληρωματικό δείκτη βιολογικών μηχανισμών.
10
Περιορισμοί της μεθόδου 16S rRNA
Η ανάλυση 16S rRNA καταγράφει κυρίως βακτηριακούς πληθυσμούς και δεν ανιχνεύει ιούς ή μύκητες, ούτε παρέχει άμεσες πληροφορίες για τη λειτουργική δραστηριότητα των μικροοργανισμών.
Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως σχετικές αναλογίες και όχι απόλυτοι αριθμοί, ενώ μπορούν να επηρεαστούν σημαντικά από πρόσφατες διατροφικές αλλαγές, αντιβιοτικά και άλλα φάρμακα.
Για τον λόγο αυτό, η εξέταση πρέπει πάντα να ερμηνεύεται στο πλαίσιο συνολικής κλινικής αξιολόγησης και όχι απομονωμένα.
11
Προετοιμασία πριν την εξέταση
Για αξιόπιστα αποτελέσματα συνιστάται αποφυγή αντιβιοτικών για τουλάχιστον 3–4 εβδομάδες, διακοπή προβιοτικών συμπληρωμάτων για περίπου 7 ημέρες και αποφυγή καθαρτικών πριν τη συλλογή δείγματος.
Η λήψη γίνεται σε αποστειρωμένο δοχείο, χωρίς επαφή με ούρα ή νερό, ενώ το δείγμα πρέπει να παραδοθεί στο εργαστήριο σύμφωνα με τις οδηγίες συντήρησης.
Πρόσφατες έντονες διατροφικές αλλαγές ή φαρμακευτική αγωγή καλό είναι να αναφέρονται, καθώς μπορεί να επηρεάσουν το μικροβιακό προφίλ.
12
Πώς ερμηνεύονται τα αποτελέσματα
Η αξιολόγηση βασίζεται σε δείκτες μικροβιακής ποικιλότητας, παρουσία προστατευτικών στελεχών και επικράτηση δυνητικά παθογόνων μικροοργανισμών.
Η ερμηνεία απαιτεί ιατρική κρίση και συσχέτιση με συμπτώματα, ιστορικό και άλλα εργαστηριακά ευρήματα — όχι αυτοματοποιημένες διατροφικές οδηγίες από λογισμικό.
Στόχος δεν είναι η «τελειοποίηση» αριθμών, αλλά η κατανόηση πιθανών παθοφυσιολογικών μηχανισμών πίσω από τα κλινικά συμπτώματα.
13
Συχνά κλινικά λάθη
Συχνό κλινικό λάθος αποτελεί η λήψη προβιοτικών πριν την εξέταση, γεγονός που αλλοιώνει προσωρινά το μικροβιακό προφίλ και μειώνει τη διαγνωστική αξία των αποτελεσμάτων.
Εξίσου συχνή είναι η ερμηνεία των ευρημάτων χωρίς κλινικό πλαίσιο ή η αυτόματη εφαρμογή διατροφικών οδηγιών από λογισμικό, χωρίς ιατρική αξιολόγηση.
Τέλος, η ανάλυση μικροβιώματος δεν αντικαθιστά ενδοσκοπικό έλεγχο ή στοχευμένες εξετάσεις όταν υπάρχει υποψία οργανικής νόσου.
14
Σε τι διαφέρει από την καλλιέργεια κοπράνων
Η κλασική καλλιέργεια κοπράνων στοχεύει στην ανίχνευση περιορισμένου αριθμού παθογόνων βακτηρίων, κυρίως σε οξείες λοιμώξεις.
Αντίθετα, η αλληλούχιση 16S rRNA χαρτογραφεί συνολικά το μικροβιακό οικοσύστημα του εντέρου, παρέχοντας εικόνα της ισορροπίας μεταξύ ωφέλιμων και επιβαρυντικών πληθυσμών.
Οι δύο εξετάσεις είναι συμπληρωματικές και εξυπηρετούν διαφορετικούς κλινικούς σκοπούς — δεν αποτελούν ανταγωνιστικές μεθόδους.
15 Συχνές Ερωτήσεις
Είναι επώδυνη η εξέταση;
Όχι — απαιτεί μόνο δείγμα κοπράνων στο σπίτι.
Ανιχνεύει παράσιτα;
Όχι αξιόπιστα· απαιτούνται ειδικές παρασιτολογικές εξετάσεις.
Μπορεί να αντικαταστήσει τη γαστροσκόπηση;
Όχι — είναι συμπληρωματικό εργαλείο.
Πόσος χρόνος χρειάζεται για τα αποτελέσματα;
Συνήθως απαιτούνται 7–14 ημέρες, ανάλογα με το εργαστήριο και τη διαδικασία αλληλούχισης.
Μπορώ να κάνω την εξέταση ενώ παίρνω φάρμακα;
Ορισμένα φάρμακα, ιδιαίτερα τα αντιβιοτικά, επηρεάζουν σημαντικά το αποτέλεσμα· καλό είναι να ενημερώνεται πάντα ο ιατρός πριν τη λήψη δείγματος.
Χρειάζεται επανάληψη της εξέτασης;
Σε ορισμένες περιπτώσεις γίνεται επανέλεγχος μετά από διατροφικές παρεμβάσεις ή θεραπεία, ώστε να αξιολογηθεί η μεταβολή του μικροβιακού προφίλ.
16 Κλείστε Ραντεβού
Ερμηνεία αποτελεσμάτων από ιατρό στο εργαστήριό μας. Μπορείτε να προγραμματίσετε εξέταση ή να δείτε τον πλήρη κατάλογο διαθέσιμων εξετάσεων.
<
17
Βιβλιογραφία
https://mikrobiologikolamia.gr/katalogos-eksetaseon/
https://www.nature.com/articles/nature05414
https://www.nature.com/articles/nature08821
https://www.nature.com/articles/s41586-019-1238-8
https://journals.physiology.org/doi/10.1152/physrev.00018.2018
https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra1600266
Δρ. Παντελής Αναγνωστόπουλος, Ιατρός Μικροβιολόγος – Βιοπαθολόγος
Μικροβιολογικό Εργαστήριο Λαμίας, Έσλιν 19, Λαμία 35100
📞 +30-22310-66841 • Δευτέρα–Παρασκευή 07:00–13:30



